کلونینگ و توالی یابی ژن leishmania homologue of receptors for activated c kinase (lack) لیشمانیا ماژور سویه استاندارد ایرانی
نویسندگان
چکیده
هدف: لیشمانیوزیس جزء بیماری های عفونی– انگلی مهم دنیاست که توسط تک یاخته های نسجی خونی داخل سلولی اجباری از جنس لیشمانیا ایجاد می شود. ژن lack یک پروتئین 36 کیلودالتونی است که در فرم های پروماستیگوت و آماستیگوت انگل، در گونه های مختلف لیشمانیا به مقدار بالایی وجود دارد. lack پاسخ ایمنی سریعی علیه انگل ایجاد می کند؛ بنابراین این ژن برای تهیه آنتی ژن نوترکیب مناسب بوده و انتخاب خوبی به عنوان واکسن dna علیه لیشمانیا ماژور است، این مطالعه با هدف کلون نمودن ژن lack لیشمانیا ماژور ایران برای تولید پروتئین نوترکیب برای ساخت واکسن انجام شده است. مواد و روش ها: در این تحقیق dna از سویه استاندارد ایرانی لیشمانیا ماژور (mrho/ir/75/er) استخراج و ژن lack با استفاده از روش pcr تکثیر شد. سپس قطعه 939 جفت بازی تکثیر شده در پلاسمید ptz57r/t کلون شد. پلاسمید نوترکیب در باکتری اشرشیاکلی سویه tg1 ترانسفورم و توالی یابی شد. نتایج: آنالیز تعیین توالی ژن lack لیشمانیا ماژور کلون شده در پلاسمید ptz57r/t مشخص کرد که قطعه ای 939 جفت بازی در این پلاسمید کلون شده است و ژن کلون شده، ژن lack لیشمانیا ماژور است. این سویه ایرانی 89 درصد با سویه موجود در بانک ژنی با کد lmjf28.2740 شباهت دارد. این کلونینگ با روش های pcr و برش آنزیمی تأیید شد. نتیجه گیری: نتایج به دست آمده نشان داد که این ژن با موفقیت تکثیر و کلون شده و از این کلون می توان کلون هایی در پلاسمید بیانی پروکاریوتی برای تهیه آنتی ژن نوترکیب و پلاسمید یوکاریوتی برای تهیه واکسن dna استفاده کرد. این مطالعه راهی برای پیشرفت تولید پلاسمیدهای نوترکیب برای مطالعات آینده است.
منابع مشابه
ارزیابی ایمنی زایی پلاسمیدهای کدکننده ژنهای lack (leishmania homologue of receptor for activated c kinase) و tsa (thiol specific antioxidant) لیشمانیا ماژور در موش balb/c
لیشمانیوزیس جزء بیماریهای عفونی– انگلی مهم دنیاست که توسط تک یاخته های نسجی خونی داخل سلولی اجباری از جنس لیشمانیا ایجاد می شود. افرادی که زخم های سالک آنها خوب شده باشد، در برابر این بیماری محافظت می شوند. واکسنهای dna، نوع جدیدی از واکسنها هستند که باعث بیان پروتئین در سلولهای پستاندران می شوند. واکسنهای dna با استفاده از یک یا چند ژن می تواند ایمنی سلولی و هومورال را تحریک کنند. (leishmania ...
cloning and sequencing of l. major leishmania homologue of receptors for activated c kinase (lack) gene
objective: leishmaniasis is caused by parasitic protozoa of the genus leishmania which in the infected host is obligate intracellular parasite. lack gene is conserved among related leishmania species. lack is the immuno-dominant antigen of l.major which is considered as the most promising molecule for a recombinant or dna vaccine against leishmaniasis. materials and methods: in this study the ...
متن کاملکلونینگ ژن p4 لیشمانیا ماژور
Background and Aim: Leishmania major p4 gene is normally expressed during amastigote form of the parasite and can be a good candidate for producing an effective vaccine. The aim of this study is to clone p4 gene in a suitable vector for further vaccine production studies .Materials and Methods: This is an experimental study. Leishmania promastigote was grown in N.N.N. medium and later in th...
متن کاملLeishmania mexicana: LACK (Leishmania homolog of receptors for activated C-kinase) is a plasminogen binding protein.
Leishmania mexicana is able to interact with the fibrinolytic system through its component plasminogen, the zymogenic form of the protease plasmin. In this study a new plasminogen binding protein of this parasite was identified: LACK, the Leishmania homolog of receptors for activated C-kinase. Plasminogen binds recombinant LACK with a K(d) value of 1.6±0.4 μM, and binding is lysine-dependent si...
متن کاملA comprehensive analysis of LACK (Leishmania homologue of receptors for activated C kinase) in the context of Visceral Leishmaniasis
The Leishmania homologue of activated C kinase (LACK) a known T cell epitope from soluble Leishmania antigens (SLA) that confers protection against Leishmania challenge. This antigen has been found to be highly conserved among Leishmania strains. LACK has been shown to be protective against L. donovani challenge. A comprehensive analysis of several LACK sequences was completed. The analysis sho...
متن کاملکلونینگ ژن p۴ لیشمانیا ماژور
زمینه و هدف: ژن p4 لیشمانیا ماژور، در مرحله آماستیگوت انگل بیان می شود که احتمالاً ترکیب مناسب جهت تهیه واکسن بر علیه لیشمانیوز است. هدف از انجام این پژوهش، کلون این ژن در یک وکتور (ناقل) مناسب برای مطالعات بیشتر در زمینه واکنس سازی بود.روش بررسی: این بررسی به صورت تجربی انجام گرفته است. در مرحله پروماستیگوت، لیشمانیا ماژور در محیط n.n.n و سپس در محیط rpmi1640 به صورت انبوه کشت داده شد. در ادامه...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستیجلد ۱۱، شماره Autumn ۲۰۰۸ & Winter ۲۰۰۹، صفحات ۱۹-۳۰
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023